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南京信帆生物:稀有細(xì)胞檢測(cè),不做無(wú)謂的犧牲
更新時(shí)間:2016-05-21   點(diǎn)擊次數(shù):1165次

生物通報(bào)道:有些細(xì)胞在血液和組織中的含量很少但卻很重要,比如干細(xì)胞、循環(huán)內(nèi)皮細(xì)胞、循環(huán)腫瘤細(xì)胞和殘留病變細(xì)胞。準(zhǔn)確檢測(cè)和分析這些稀有細(xì)胞,是理解疾病進(jìn)程和發(fā)育機(jī)制的關(guān)鍵。然而稀有細(xì)胞檢測(cè)并不是一件容易的事,會(huì)受到樣本質(zhì)量等多種因素的影響。

流式細(xì)胞技術(shù)能對(duì)每個(gè)細(xì)胞進(jìn)行多種定量分析,是在血液、骨髓等組織中檢測(cè)稀有細(xì)胞的有力工具。稀有細(xì)胞檢測(cè)往往需要大量樣本才能采集到足夠的數(shù)據(jù),這個(gè)時(shí)候傳統(tǒng)流式細(xì)胞儀也有些發(fā)怵,因?yàn)榇髽颖疽馕吨幚頃r(shí)間長(zhǎng),如果不想犧牲檢測(cè)靈敏度,就不能貿(mào)然加快進(jìn)樣速率。

聲波聚焦技術(shù),不做任何無(wú)謂的犧牲

樣本溶液注射到流式細(xì)胞儀的時(shí)候,細(xì)胞是隨機(jī)分布在三維空間內(nèi)的。讓這些細(xì)胞逐個(gè)穿過(guò)激光束,對(duì)于準(zhǔn)確采集數(shù)據(jù)非常重要。絕大多數(shù)流式細(xì)胞儀通過(guò)快速流動(dòng)的鞘液實(shí)現(xiàn)這一點(diǎn)。鞘液帶動(dòng)細(xì)胞并將其限制在中心位置,進(jìn)而建立單細(xì)胞流,這一過(guò)程稱(chēng)為水動(dòng)力聚焦。

與傳統(tǒng)水動(dòng)力聚焦不同的是,聲波聚焦技術(shù)利用超聲波將細(xì)胞緊密聚集在樣本流中間,匯聚成一條直線(xiàn)。這種超聲波大于2 MHz,與醫(yī)學(xué)成像中的超聲波類(lèi)似。聲波聚焦流式細(xì)胞儀基本不受進(jìn)樣速率的影響,能使細(xì)胞強(qiáng)聚焦于激光檢測(cè)點(diǎn),與樣本-鞘液的比率無(wú)關(guān)。(延伸閱讀:Life Tech發(fā)布新一代流式細(xì)胞儀)

不犧牲通量和精度!--?xml:namespace prefix = o ns = "urn:schemas-microsoft-com:office:office" /--

傳統(tǒng)的水動(dòng)力聚焦技術(shù)受到了不少限制。流速提高會(huì)增大樣本流的寬度,使細(xì)胞的聚焦效果下降。細(xì)胞偏離激光中心越遠(yuǎn),激發(fā)光強(qiáng)度變化就越大,CV值也越高。研究人員經(jīng)常需要在分析通量和精度之間尋求平衡。

聲波聚焦技術(shù)在很大程度上與進(jìn)樣流速無(wú)關(guān),不論樣本流與鞘液流的比例如何,都能使細(xì)胞緊密地聚集于激光檢測(cè)焦點(diǎn),避免分散。這樣可以采集更多光子,在*的樣本通量下保證高精度分析。

聲波聚焦流式細(xì)胞儀在高達(dá)1 mL/min的進(jìn)樣速率下也能維持聚焦,讓研究人員能夠獲得更小的CV值,更好地鑒別弱陽(yáng)性信號(hào)和背景,實(shí)現(xiàn)更小的差異和更好的信號(hào)分離。

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不犧牲檢測(cè)速度

稀有細(xì)胞檢測(cè)一般需要采集大量細(xì)胞,才能獲得準(zhǔn)確而可靠的結(jié)果。在這種情況下,傳統(tǒng)流式細(xì)胞儀需要很長(zhǎng)的處理時(shí)間。不過(guò),聲波聚焦流式細(xì)胞儀的樣本運(yùn)行速率非??欤蛇_(dá)1,000 μL /min),每次運(yùn)行可采集2000萬(wàn)個(gè)細(xì)胞。這么高的樣本采集速率和樣本量可以幫助人們快速準(zhǔn)確地檢測(cè)稀有細(xì)胞,不會(huì)影響數(shù)據(jù)的質(zhì)量。

不犧牲珍貴樣本

樣本制備對(duì)稀有細(xì)胞檢測(cè)有很大的影響。舉例來(lái)說(shuō),洗脫和裂解紅細(xì)胞(RBC)會(huì)造成嚴(yán)重的細(xì)胞損失和損傷。聲波聚焦流式細(xì)胞儀支持無(wú)洗脫、無(wú)裂解的流式實(shí)驗(yàn)方案,可以zui大程度的保留珍貴樣本,避免不必要的細(xì)胞損失,簡(jiǎn)化樣本制備步驟。

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