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DEAE-Dextran細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑盒使用注意事項(xiàng)
更新時(shí)間:2020-04-15   點(diǎn)擊次數(shù):886次

DEAE-Dextran細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑盒使用注意事項(xiàng)


DEAE-Dextran細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑盒(DEAE-Dextran Transfection Kit)是一種適合于把DNA轉(zhuǎn)染到培養(yǎng)的真核細(xì)胞中的轉(zhuǎn)染試劑盒。

    
目前基于DEAE-dextran的細(xì)胞轉(zhuǎn)染方法有兩種,一種方法為把DNA和DEAE--dextran混合后加入到細(xì)胞中,另一種方法為先用DEAE?-dextran預(yù)處理細(xì)胞,然后再加入DNA。后一種方法是在前一種方法的基礎(chǔ)上經(jīng)過改進(jìn)而產(chǎn)生的,對(duì)于一些細(xì)胞包括Hela、COS、NIH3T3和KB細(xì)胞等,后一種方法可以增加細(xì)胞對(duì)DNA的攝入量,顯著改善轉(zhuǎn)染效果。氯奎的加入可以抑制溶酶體對(duì)外源DNA的降解,從而提高轉(zhuǎn)染效率。但對(duì)于具體的細(xì)胞、具體的培養(yǎng)條件,如需獲得更加理想的轉(zhuǎn)染效率,必須自行摸索上述各種轉(zhuǎn)染方法,找出優(yōu)化的轉(zhuǎn)染方法。


注意事項(xiàng):
    
使用高純度的DNA或RNA有助于獲得較高的轉(zhuǎn)染效率。
    
轉(zhuǎn)染前細(xì)胞必須處于良好的生長(zhǎng)狀態(tài)。
    
試劑盒中各試劑均經(jīng)過無菌處理,可以直接使用。在細(xì)胞轉(zhuǎn)染過程中要嚴(yán)格注意無菌操作。
    
需自備用于洗滌的PBS或HBSS,以及用于稀釋10XPBS的無菌水。
    
稀釋或配制DEAE-Dextran溶液或DNA的1XPBS可以用試劑盒中提供的10XPBS稀釋。
    
氯奎溶液對(duì)人體有害,請(qǐng)注意適當(dāng)防護(hù)。
    
為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

 

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