人高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)elisa試劑盒簡介
高遷移率族蛋白B1（[1] ，HMGB1）是一種高度保守的核蛋白，廣泛分布于哺乳動(dòng)物細(xì)胞。隨著其晚期促炎作用的發(fā)現(xiàn)，HMGB1成為近年來危重醫(yī)學(xué)研究的熱點(diǎn)之一。本文就其家族分類、基因和蛋白結(jié)構(gòu)、細(xì)胞生物學(xué)效應(yīng)方究進(jìn)展進(jìn)行綜述。
中文名 高遷移率族蛋白B1 外文名 high mobility group protein 簡 稱 HMGB1 類 別 核蛋白 發(fā)現(xiàn)者 Johns 發(fā)現(xiàn)時(shí)間 20世紀(jì)60年代 分布地區(qū) 哺乳動(dòng)物細(xì)胞
人高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)elisa試劑盒使用說明書
1、用緩沖液將抗體稀釋至1-10ug/ml。在反應(yīng)孔中加0.1ml，4℃ 過夜。次日，棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗3次。
2、加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應(yīng)孔中，置37℃ 孵育1小時(shí)。然后洗滌(同時(shí)做空白孔，陰性對(duì)照孔及陽性對(duì)照孔)。
3、加酶標(biāo)抗體：于各反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5～1小時(shí)，洗滌。
4、加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘。
5、終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強(qiáng)，陰性反應(yīng)為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號(hào)表示。也可測OD值：在ELISA檢測儀上，于450nm(若以ABTS顯色，則410nm)處，以空白對(duì)照孔調(diào)零后測各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍，即為陽性。
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